การผลิตและลักษณะสมบัติของโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อไซโตโครม P4501A (CYP1A) ในปลากะพงขาว (Lates calcarifer Bloch) ที่ได้รับสารเบนโซ[เอ]ไพรีน
Abstract
การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่มีความจำเพาะต่อไซโตโครม P4501A (CYP1A) ของปลากะพงขาว (Lates calcarifer Bloch) ที่ได้รับสารเบนโซ[เอ]ไพรีน โดยการฉีดกระตุ้นหนูขาวด้วย CYP1A จากตับปลากะพงขาวสกัดจำนวน 4 ครั้ง จากนั้นนำม้ามหนูที่ตอบสนองต่อแอนติเจนมาหลอมกับ myelomas เพื่อผลิตเซลล์ลูกผสม คัดเลือกโคลนที่มีคุณสมบัติจำเพาะต่อ CYP1A จากตับปลากะพงขาวสกัด ที่มีน้ำหนักโมเลกุล 56 และ 74 กิโลดาลตัน โดยเทคนิค dot blot และ western blot พบโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่มีความจำเพาะต่อ CYP1A จำนวน 3 โคลน ได้แก่ MAb- sea bass CYP1A 1.4-3D, 2.3-4G-6E และ 155-4D ที่มีไอโซไทป์ เป็น IgG1, IgG1 และ IgM ตามลำดับ โมโนโคลนอลที่ผลิตได้นี้จัดได้เป็น 2 กลุ่มตามความจำเพาะของ CYP1A ในรูปแบบเสียสภาพ (denatured) และรูปแบบไม่เสียสภาพ (native form) ได้แก่ กลุ่มที่ 1 จำเพาะต่อ CYP1A ในรูปแบบเสียสภาพเท่านั้น มี 2 โคลน ได้แก่ MAb-sea bass CYP1A 1.4-3D และ 2.3-4G-6E และ กลุ่มที่ 2 จำเพาะต่อ CYP1A ทั้งในรูปแบบเสียสภาพ และรูปแบบไม่เสียสภาพ มี 1 โคลน ได้แก่ MAb-sea bass CYP1A 155-4D ซึ่งแอนติบอดีที่ผลิตได้นี้สามารถนำไปใช้ตรวจสอบ CYP1A ได้ด้วยเทคนิค dot blot, western blot และ immunohistochemistry หรือพัฒนาเทคนิค ELISA ได้ต่อไปนอกจากนี้ พบว่าโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่ผลิตได้ทั้ง 3 โคลนนี้มีสมบัติในการเกิดปฏิกิริยาข้ามกลุ่มได้กับปลาทะเลชนิดต่าง ๆ ปลาน้ำกร่อย และปลาน้ำจืดบางชนิดได้
คำสำคัญ : ไซโตโครม P4501A โมโนโคลนอลแอนติบอดี ปลากะพงขาว พีเอเอช เบนโซ[เอ]ไพรีน
Full Text:
PDFRefbacks
- There are currently no refbacks.